1. 怎么使用Vector NTI 11.5设计引物.急,求详细步骤
VECTOR设计引物必须为特异性性引物首先需要注意酶切位点位置.其次为了保证得到完整的酶切位点及准确性一般距离位点50-100BP碱基处设计引物.设计引物具体原则如下:
测序用引物要求非常严格,不同于PCR用引物.PCR用引物一般只要能和模板结合,3’端的几个碱基能完全配对,即使引物长达80~100多个碱基,只要调整PCR反应条件,也能成功进行PCR反应.而测序用引物便不一样了,必须严格符合以下要求.
(1)长度在18~25个碱基左右,一般选择20个碱基(根据GC含量作适当调整),
(2)3’端尽量选择G或C碱基(但不绝对),以增加与模板的结合能力.
(3)Tm温度应选择50℃~70℃左右.
(4)GC含量应选择在50%左右,尽量避开A、T、G、C的连续结构.
(5)避开引物自身形成发夹结构或引物二聚体结构等复杂结构.
(6)保证引物和模板100%匹配,特别是3’端的几个碱基一定要100%匹配.同时必须严格保证引物和模板之间只能有一个结合位点.
2. 怎么使用Vector NTI 11.5设计引物。急!求详细步骤
NCBI呗,nucleotide,根据条件一搜就行了
3. 如何用电脑软件绘制质粒图谱
一个合格质粒的组成要素 复制起始位点Ori,即控制复制起始的位点。原核生物DNA 分子中只有一个复制起始点。而真核生物DNA 分子有多个复制起始位点。 抗生素抗性基因:可以便于加以检测,如Amp+ ,Kan+ 多l 克隆位点:MCS 克隆携带外源基因片段 P/E:启动子/增强子 Terms:终止信号 加poly(A)信号:可以起到稳定mRNA 作用 。
二、如何阅读质粒图谱
第一步:首先看Ori 的位置,了解质粒的类型(原核/真核/穿梭质粒) Ori 的箭头指复制方向,其他元件标注的箭头多指转录方向(正向)。
第二步:再看筛选标记,如抗性,决定使用什么筛选标记:
(1)Ampr:水解β -内酰胺环,解除氨苄的毒性。
(2)tetr :可以阻止四环素进入细胞。
(3)camr:生成氯霉素羟乙酰基衍生物,使之失去毒性。
(4)neor(kanr):氨基糖苷磷酸转移酶,使G418(卡那霉素衍生物)失活。
(5)hygr:使潮霉素β 失活。
第三步:看多克隆位点(MCS)。它具有多个限制酶的单一切点,便于外源基因的插入。如果在这些位点外有外源基因的插入,会导致某种标志基因的失活,而便于筛选。决定能不能放目的基因以及如何放置目的基因。
第四步:再看外源 DNA 插入片段大小。质粒一般只能容纳小于10Kb 的外源DNA 片段。
4. Vector NTI Advance 11安装过程最后一步出现一个带有红叉的对话框,总是安装失败,急死人了
如此情况,可能是系统本身有问题造成的。直接换个验证过的系统盘重装系统就行了,这样就可以全程自动、顺利解决 系统中软件无法安装 的问题了。用u盘或者硬盘这些都是可以的,且安装速度非常快。但关键是:要有兼容性好的(兼容ide、achi、Raid模式的安装)并能自动永久激活的、能够自动安装机器硬件驱动序的系统盘,这就可以全程自动、顺利重装系统了。方法如下:
1、U盘安装:用ultraiso软件,打开下载好的系统安装盘文件(ISO文件),执行“写入映像文件”把U盘插到电脑上,点击“确定”,等待程序执行完毕后,这样就做好了启动及安装系统用的u盘,用这个做好的系统u盘引导启动机器后,即可顺利重装系统了;
2、硬盘安装:前提是,需要有一个可以正常运行的Windows系统,提取下载的ISO文件中的“*.GHO”和“安装系统.EXE”到电脑的非系统分区,然后运行“安装系统.EXE”,直接回车确认还原操作,再次确认执行自动安装操作(执行前注意备份C盘重要资料);
3、图文版教程:有这方面的详细图文版安装教程怎么给你?不能附加的。会被系统判为违规的。
用这个可以解决问题的,重装系统的系统盘下载地址在“知道页面”右上角的…………si xin zhong…………有!望采纳!