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测dna的纯度应该读取哪个数据

发布时间:2024-12-28 10:11:11

A. DNA和RNA纯度检测的问题!

蛋白中trp、tyr、phe的吸光度为280nm,所以280nm常用来表示蛋白质吸光度;而260nm为DNA的吸光度。
理论上,纯的RNA情况下:OD260/OD280的值为2,纯的DNA情况下:OD260/OD280的值为1.8.OD260反映的是溶液中核酸的浓度,OD280反映的是溶液中蛋白质或者氨基酸的浓度。
样品中如果含有蛋白质及苯酚,A260/A280比值会明显下降。对于纯的样品只要读出260 nm 的A值即可以算出含量。通常以A值为1相当于50微克/ml 双螺旋DNA,或者40微克/ml 单链DNA(RNA),或者20微克/ml 寡核苷酸计算。
OD260/OD280=1.9~2.0 RNA居多,纯度已经很高了。
纯DNA:OD260/OD280≈1.8(>1.9,表明有RNA污染;<1.6,表明有蛋白质、酚等污染)
纯RNA:1.7 <OD260/OD280<2.0(2.0时表明可能有异硫氰酸残存)

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