① 活性氧的流式数据怎么看
活性氧的流式数据看法:这类实验一般都是使用荧光探针来检测细胞内的活性氧的浓度,特异性比较低。结果是比较实验组和对照组的荧光强度,理论上,荧光强度和活性氧的浓度是正相关的关系。
通常活性氧阳性对照在刺激细胞20-30分钟后可以显著提高活性氧水平。收集细胞后装载探针:按照1:1000用无血清培养液稀释DCFH-DA,使终浓度为10微摩尔/升。细胞收集后悬浮于稀释好的DCFH-DA中,细胞浓度为一百万至二千万/毫升,37℃细胞培养箱内孵育20分钟。
对核酸的氧化损伤
DNA 的氧化损伤主要包括:一是碱基的修饰。羟基自由基可对胸腺嘧啶的5,6-双键进行加成,形成胸腺嘧啶自由基。碱基的改变可导致其基团控制下的许多生化与蛋白合成过程受到破坏。二是键的断裂。自由基从DNA 的戊糖夺取了氢原子,使之在C4位置形成具有未配对电子的自由基,然后,此自由基又在β-位置发生链的断裂。