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測dna的純度應該讀取哪個數據

發布時間:2024-12-28 10:11:11

A. DNA和RNA純度檢測的問題!

蛋白中trp、tyr、phe的吸光度為280nm,所以280nm常用來表示蛋白質吸光度;而260nm為DNA的吸光度。
理論上,純的RNA情況下:OD260/OD280的值為2,純的DNA情況下:OD260/OD280的值為1.8.OD260反映的是溶液中核酸的濃度,OD280反映的是溶液中蛋白質或者氨基酸的濃度。
樣品中如果含有蛋白質及苯酚,A260/A280比值會明顯下降。對於純的樣品只要讀出260 nm 的A值即可以算出含量。通常以A值為1相當於50微克/ml 雙螺旋DNA,或者40微克/ml 單鏈DNA(RNA),或者20微克/ml 寡核苷酸計算。
OD260/OD280=1.9~2.0 RNA居多,純度已經很高了。
純DNA:OD260/OD280≈1.8(>1.9,表明有RNA污染;<1.6,表明有蛋白質、酚等污染)
純RNA:1.7 <OD260/OD280<2.0(2.0時表明可能有異硫氰酸殘存)

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