① 活性氧的流式數據怎麼看
活性氧的流式數據看法:這類實驗一般都是使用熒光探針來檢測細胞內的活性氧的濃度,特異性比較低。結果是比較實驗組和對照組的熒光強度,理論上,熒光強度和活性氧的濃度是正相關的關系。
通常活性氧陽性對照在刺激細胞20-30分鍾後可以顯著提高活性氧水平。收集細胞後裝載探針:按照1:1000用無血清培養液稀釋DCFH-DA,使終濃度為10微摩爾/升。細胞收集後懸浮於稀釋好的DCFH-DA中,細胞濃度為一百萬至二千萬/毫升,37℃細胞培養箱內孵育20分鍾。
對核酸的氧化損傷
DNA 的氧化損傷主要包括:一是鹼基的修飾。羥基自由基可對胸腺嘧啶的5,6-雙鍵進行加成,形成胸腺嘧啶自由基。鹼基的改變可導致其基團控制下的許多生化與蛋白合成過程受到破壞。二是鍵的斷裂。自由基從DNA 的戊糖奪取了氫原子,使之在C4位置形成具有未配對電子的自由基,然後,此自由基又在β-位置發生鏈的斷裂。